Отчёт по заданию Кутушова М.В. По поводу влияния ОФ-2 – (препарата применяемого в ДСТ терапии) на митохондрии (МХ) печени крысы.

0.0 / 5  (0 голосов)

Понедельник 11 Сентябрь 2006

Лаборатория термодинамики и энергетики
Биологических систем ИТЭБ РАН

 

Испытание эффекта ОФ-2 на изолированные митохондрии печен крысы. Митохондрии изолировали из половозрелых крыс линии Wistar
Методом дифференциального центрифугирования в среде, содержащей 0,3 сахарозы и 10 мМ HEPES, рН 7,4.
Дыхание митохондрий регистрировали полярографичеки в термостатируемой ячейке с
перемешиванием объемом 1 мл. Добавка суспензии митохондрий составляла 20-25 мкл,
так чтобы конечная концентрация по белку составляла не менее 1 мг на мл. Среда
инкубации : 0.25 М сахароза (ОСЧ), 10 мМ КС1 (ОСЧ),. 3 мМ КН2РО4. 1 мМ М8С12, 10 М
HEPES, рН 7,4.
Инкубацию проводили при фиксированной температуре 27 °С.
В качестве субстратов дыхания использовали НАД-зависиымй субстрат, не
превращающийся в сукцинат, - B-оксибутират или сукцинат по 5 мМ. Или смесь а-
кетоглютарата с малатом по 3 мМ. В качестве акцептора фосфата добавляли 100 мкм
АДФ, разобщитель - 1 мкм С1ССР.
Как показано на полярограммах, добавление разведенного 1 - 2.% мкм 0,1 % ОФ-2 приводило к торможению дыхания и разобщению окислительного фосфорилирования. Эти явления проявлялись в резкой активации несопряженного с фосфорилированием дыхания в1,5-2,5 раза и существенном подавлении скоростей фосфорилирующего дыхания и двукратном замедлении скорости фосфорилирования АТФ. Нам не удалось выявить специфики ингибиторного эфекта ОФ-2 в зависимости от вида субстрата. Однако наличие резкого ингибирования в разобщенном состоянии ( в присутствии С1ССР) свидетельствует о торможении переноса электронов, скорее всего не на первом и не на втором, а на последующих цитохром-зависимых участках дыхательной цепи и, возможно, на уровне КoQ.
Заключение: не исключено, что в механизме противоопухолевого эффекта ОФ-2 некую роль играет торможение энергопродукции и дыхания (в том числе не аккумулирующего АТФ) в митохондриях.

 

Смотрите также

Дискуссия

Комментарии

Необходимо войти в систему чтобы писать комментарии. Логин
В контакте с нами

Если Вам понравилась информация выше, пожалуйста будьте так добры и поделитесь ей с остальными пользователями интернета.

  • Technorati
  • StumbleUpon
  • LinkedIn
  • Facebook
  • Reddit
  • Digg
  • Twitter
  • del.icio.us
Ищите что-нибудь?

Если вы потерялись, смотрире сюда

Copyright © 2005 - 2018, Kutushov.org